Immunhistologie nach bildgebender Massenspektrometrie zur Verbesserung der räumlichen Auflösung

Longuespée R;Zgorzelski C;Fischer S;Kriegsmann K;Harms A;Kazdal D;Casadonte R;Schwamborn K;Stenzinger A;Weichert W;Warth A;Kriegsmann J;Schirmacher P;Kriegsmann M

2018-01-01

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Abstract

Ziel: Nach der Analyse von Gewebeproben mittels bildgebender Massenspektrometrie (MS Imaging) werden diese in der Regel mittels Hematoxylin und Eosin (H&E) gefärbt um spezifische Regionen auszuwählen. Allerdings kann es schwierig sein bestimmte Zellpopulationen in der H&E Färbung zu identifizieren. Die nachfolgende Datenanalyse, insbesondere bei supervidierter Klassifikation, kann somit in einigen Fällen beeinträchtigt sein. Durch immunhistologische Färbungen können spezifische Zellen zuverlässig identifiziert werden. Einzel- oder Doppelfärbungen wurden bisher allerdings nicht an bereits mittels MS untersuchten Gewebeproben durchgeführt. Methoden: Wir haben dekalzifizierte Knochenmarkbiopsien (n = 5) von Patienten mit multiplem Myelom mittels MS Imaging analysiert und nach folgend mit fünf verschiedenen Antikörpern (CD38, CD138, MUM1, kappa- und lambda Leichtkette) gefärbt um Plasmazellen hervorzuheben. Außerdem wurde ein pulmonales Adenokarzinom und ein pulmonales Plattenepithelkarzinom mit einer Kombination aus CK5/6/TTF1 und Napsin-A/p40 untersucht. Die Färbeintensitäten der entsprechenden Antikörper wurden mittels digitaler Software (QuPath) quantifiziert und gegen einen Seriengewebeschnitt verglichen. Ergebnisse: Bestimmte Zellpopulationen konnten durch die immunhistologische Färbung mit Routineprotokollen nach einer MS Analyse dargestellt werden. Die digitale Analyse zeigte eine geringere immunhistologische Färbeintensität nach der MS Untersuchung verglichen mit einem Seriengewebeschnitt. Die Färbequalität nach MS Imaging war ausreichend hoch, um bestimmte Zellpopulationen zuverlässig zu identifizieren. Fazit: Wir zeigen, dass immunhistologische Einzel- und Doppelfärbungen an einem bereits durch MS Imaging untersuchtem Gewebeschnitt möglich sind, allerdings geringere Färbeintensitäten im Vergleich zu Seriengewe beschnitten aufweisen